Boldog karácsonyt!

Nagyon boldog karácsonyt és 
sikerekben gazdag, boldog új évet kívánok! 

MTÜ 2014

Előadással veszünk részt a Magyar Tudomány Ünnepe programsorozaton, melynek címe: Exogén NO hatása a sóstressz indukált fiziológiai válaszreakciókra paradicsomba. 

Részletes program itt található: http://mta.hu/naptar/?event=4426

MNT 2014

2014. augusztus 27-29. között tartotta a Magyar Növénybiológiai Társaság XI. Kongresszusát Szegeden, ahol munkacsoportunk tagjaival a NKP program keretén belül végzett munkánk eredményei közül többet, poszter formájában bemutattunk.

A részletes program itt található:
http://www.novenybiologia.hu/doku.php

Pár kép a konferenciáról:

Mitokondrium szeminárium

Mára egyre több a bizonyíték, hogy a növényekben is fontos szerepet játszanak  a mitokondriumok a PCD kezdeti szakaszában (Wang és mtsai. 2001). A mitokondriumok a  reaktív oxigén formák (ROS) fő forrása  a PCD alatt (Vacca 2004) és működésük közben nitrogén-monoxid (NO) is keletkezhet (Gupta és mtsai. 2011). A mitokondriumokban a ROS növekedés és a membránpotenciál vesztés a PCD két korai jele (Yao és mtsai. 2004). A magas ROS koncentráció károsítja a mitokondrium membránfehérjéit és a PTP-n (permeability transition pore) keresztül a citokróm c transzlokációját eredményezi a citoszolba. Ez, mint proapoptotikus faktor elősegítheti a PCD iniciációját, proteázok aktiválását. Erről a rendkívül fontos útvonalról és a területen a legújabb eredményekről hallhattak előadást a hallgatók a Jedlik Ányos Ösztöndíj keretén belül.

Halálos vándor

A citokróm c a mitokondriális elektrontranszport egyik eleme, ami az elektront szállítja a III és IV komplex között. Letális stressz hatására a citokróm c kiáramlik a mitokondrium belső membránjáról a citoplazmába, ami a növényi és állati sejthalál egy közös vonása. Az állati sejtekben, mint „proapoptotikus” faktor a sejthalál iniciációját segíti elő az apoptoszóma kialakításával. Feltételezések szerint a növényekben cisztein proteázokat aktiválhat. A pályázatunk keretén belül megkezdtük a citokróm c lokalizálását Westen Blot segítségével a paradicsom növények gyökérkivonataiban.

Azocasein assay

A proteázok kimutatására alkalmas módszer az azokazein assay. Az azokazein egy nem-specifikus proteáz szubsztrát. A kimutatás lényege, hogy a proteázaktivitás hatására a kazein hidrolizálódik és az „azo” festék a reakcióközegbe kerül, amelynek az abszorbanciája 440 nm-en fotométerrel mérhető. A proteázok specifikus aktivitásának mérésére lehetőséget úgy van, hogy párhuzamosan a reakcióelegyben a megfelelő koncentrációban alkalmazott specifikus proteáz inhibitort hozzáadjuk (pl. jódacetamid, E-64, EDTA, pepstatin, PMSF). Az azonos inkubálási idő elteltével a kontroll és blokkolt minták fotométeres eredményeinek különbsége alapján számolható ki a specifikus proteáz aktivitás.

Proteázok

Munkánk során többek között a sóstressz hatására aktiválódó proteázokat vizsgáljuk. 

De mik is azok a proteázok? Proteázoknak nevezzük a fehérjék peptid kötését specifikus helyen hidrolizáló enzimeket. A növényekben megkülönböztethetünk cisztein-, szerin-, aszpartil-, treonin-, és metallo proteázokat. Mi elsősorban a cisztein- és szerin proteázokkal foglalkozunk. A proteázok általában zimogén (nem aktív) formában szintetizálódnak. Működésük speciális vegyszerekkel gátolható, mely kimutatásuk alapjául is szolgálhat. A Jedlik Ösztöndíj keretén belül feladatunk a proteázok kimutatására alkalmas módszerek kidolgozása és felhasználása az oktatásban. A következő blogbejegyzésben erről lesz majd részletesebben szó.

Génvadászat

Januárban megkezdtük az egyes cisztein proteáz alcsaládok közül az irodalomból már ismert gének expressziós vizsgálatát. RNS-t tisztítunk, majd cDNS-t írunk és a megfelelő primerekkel összerakjuk a PCR-t. Hogy mi is az a PCR? Erről itt található egy videó:

http://www.youtube.com/watch?v=DkT6XHWne6E