2014. március 31., hétfő

Azocasein assay

A proteázok kimutatására alkalmas módszer az azokazein assay. Az azokazein egy nem-specifikus proteáz szubsztrát. A kimutatás lényege, hogy a proteázaktivitás hatására a kazein hidrolizálódik és az „azo” festék a reakcióközegbe kerül, amelynek az abszorbanciája 440 nm-en fotométerrel mérhető. A proteázok specifikus aktivitásának mérésére lehetőséget úgy van, hogy párhuzamosan a reakcióelegyben a megfelelő koncentrációban alkalmazott specifikus proteáz inhibitort hozzáadjuk (pl. jódacetamid, E-64, EDTA, pepstatin, PMSF). Az azonos inkubálási idő elteltével a kontroll és blokkolt minták fotométeres eredményeinek különbsége alapján számolható ki a specifikus proteáz aktivitás.

Nincsenek megjegyzések:

Megjegyzés küldése